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X-α-gal溶液(20mg/mL,过滤除菌)图片
产品货号:
KD2230
中文名称:
X-α-gal溶液(20mg/mL,过滤除菌)
英文名称:
X-α-gal Solution(20mg/ml)
产品规格:
1mL|5×1mL|1mL×10
发货周期:
1~3天
产品价格:
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保存条件:-20℃避光储存,未开封有效期12个月。
包装内容:
产品说明:
X-α-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚基-α-D-吡喃半乳糖苷)是α-半乳糖苷酶(MEL1)的显色反应底物,更为常见的X-Gal是β-半乳糖苷酶(LacZ)的显色反应底物。α-半乳糖苷酶可水解无色的X-α-Gal底物,并生成蓝色的产物。通过肉眼可见的蓝白斑筛选,可快速而简便的识别阳性克隆。
MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码外泌型的α-半乳糖苷酶。如果蛋白无互作,报告基因MEL1不表达,菌落呈乳白色;如果蛋白发生互作,报告基因MEL1表达,菌落呈蓝色,亦可根据菌落蓝色深浅,初步判断蛋白互作强度。
X-α-Gal与缺陷型筛选平板同时使用,可有效提高筛选效率,排除假阳性克隆,主要应用于酵母双杂交实验GAL4酵母表达系统中蛋白互做的阳性克隆的检测。也可用于筛选含α-半乳糖苷酶基因细菌菌株;区分肠杆菌科内的不同菌种,以及区分双歧杆菌和乳酸菌;组织化学中用于酶活性的检测等。
母液配制:
X-α-Gal母液(20mg/mL):取20mg X-α-Gal溶于1mL DMF,或等比例放大,过滤除菌。
使用方法:
涂布于预制平板:
1.临用前用X-α-Gal稀释液(也可以用DMF)稀释X-α-Gal母液至4mg/mL。(请于超净台无菌操作,按需稀释,稀释后的X-α-Gal勿久存)
2.涂布200μL(φ15cm)或者100μL(φ10cm)X-α-Gal储存液于预制平板上;
3.置于超净台或者37℃培养箱至液体被吸收(可以置于超净台避光过夜晾干);
4.将转化细菌或酵母涂于平板上,于37℃或30℃培养直至蓝色菌斑出现。
直接加入培养基:
1.将已灭菌固体培养基冷却至50~55℃;
2.100mL固体培养基加入100~200μL X-α-Gal母液混匀,快速倒平板。
携带MEL1基因的酵母菌株:
Y2HGold、Y190、AH109、Y187、PG69-2A。
相关搜索:X-α-gal溶液(20mg/mL,过滤除菌)X-α-gal Solution(20mg/ml)
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